আনবিক জীববিজ্ঞানের গবেষণা পদ্ধতি এবং তাদের ব্যবহার

আনবিক জীববিজ্ঞানের গবেষণা পদ্ধতি আধুনিক ঔষধ, ফরেনসিক বিজ্ঞান, এবং জীববিজ্ঞানের একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। ডিএনএ এবং RNA 'র গবেষণায় অগ্রগতি ধন্যবাদ, ব্যক্তি অ্যাসিড, ইত্যাদি মিশ্রণ কাঙ্ক্ষিত নিউক্লিক এসিড চিনতে জীবের জিনোম ণিজন্ত এজেন্ট এক্সপ্লোর করার নির্ধারণ, সক্ষম হয়

আনবিক-জৈবিক পদ্ধতি। এটা কি?

বিজ্ঞানীদের 70-80s পিছনে প্রথম অর্থোদ্ধারে ছিল হিউম্যান জিনোম। এই ইভেন্টটি জেনেটিক ইঞ্জিনিয়ারিং এবং আণবিক জীববিজ্ঞান উন্নয়নে অনুপ্রাণিত দিলেন। ডিএনএ ও আরএনএ বৈশিষ্ট্য স্টাডি যে বোঝানো হয়েছে এটা এখন রোগ নির্ণয়ের, অধ্যয়ন জিনের উদ্দেশ্যে এই নিউক্লিক আসিড ব্যবহার করা সম্ভব।

ডিএনএ ও আরএনএ প্রস্তুতি

আনবিক জীববিজ্ঞানের ডায়গনিস্টিক পদ্ধতি প্রায়ই এই: উপাদান শুরু প্রয়োজন নিউক্লিক এসিড। সেখানে বসবাসরত প্রাণীর কোষ থেকে এই পদার্থ নির্বাচন করতে বিভিন্ন উপায় আছে। প্রত্যেকটি তার সুবিধা এবং অসুবিধা আছে, এবং যখন বিশুদ্ধ আকারে নিউক্লিক আসিড আলাদা একটি পদ্ধতি বেছে নেওয়ার এটা বিবেচনা করা উচিত।

Marmur দ্বারা ডিএনএ 1. প্রস্তুতি। পদ্ধতি, এলকোহল পদার্থ মিশ্রণ চিকিত্সায় গঠিত বিশুদ্ধ ডিএনএ ফলে precipitates। এই পদ্ধতিটির downside হয় জারক পদার্থ, PHENOL এবং ক্লোরোফর্ম ব্যবহার।

2. গম্ভীর গর্জন উপর DNA- এর বিচ্ছিন্নতা। প্রধান পদার্থ যে এখানে ব্যবহার করা হয় - guanidine thiocyanate (GuSCN) হয়। এটা তোলে জবানবন্দি প্রচার করে ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিয়িক এসিড বিশেষ নিম্নস্তর, থেকে তা পরবর্তীকালে একটি বিশেষ বাফার মাধ্যমে সংগ্রহ করা যায় উপর। তবে GuSCN - TCP সংক্রান্ত সংধাবক, এবং এমনকি যে কিছু অংশ ডিএনএ জমা পরার পলিমেরেজ চেন রিয়াকসান, যা গুরুত্বপূর্ণ যখন নিউক্লিক আসিড সঙ্গে কাজ করছে অবশ্যই প্রভাবিত করতে পারে।

3. অমেধ্য PRECIPITATION। পদ্ধতি পূর্ববর্তী বেশী যে অণু নিজেদের dehoksiribonukleinovoy অ্যাসিড এবং অমেধ্য জমা নেই থেকে পৃথক। এই কাজের জন্য, আয়ন এক্সচেঙ্গার ব্যবহার করুন। অসুবিধা যে সকল পদার্থ নিষ্পত্তির পারে।

4. ভর স্ক্রীনিং। এই পদ্ধতি ক্ষেত্রে ব্যবহৃত যখন আপনি DNA অণুর গঠন, এবং কিছু পরিসংখ্যান পেতে দরকার সঠিক তথ্য থাকতে প্রয়োজন হবে না হয়। কারণ নিউক্লিক এসিড গঠন যখন ডিটারজেন্ট, বিশেষ করে ক্ষার হ্যান্ডলিং ক্ষতিগ্রস্ত হতে পারে।

গবেষণা পদ্ধতি শ্রেণীবিভাগ

গবেষণার সকল আণবিক-জৈবিক পদ্ধতি তিনটি প্রধান দলে বিভক্ত করা হয়:

1. অ্যামপ্লিফিকেশন (এনজাইম একটি বহুবচন ব্যবহার করে)। পলিমেরেজ চেন রিয়াকসান, যা ডায়গনিস্টিক পদ্ধতি অনেক গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে - এই পিসিআর অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছে।

2. Neamplifikatsionnye। পদ্ধতি এই গ্রুপ সরাসরি নিউক্লিক এসিড মিশ্রণ কাজ সঙ্গে সংশ্লিষ্ট। উদাহরণ স্থানেই শঙ্কর ইত্যাদি, 3 ধরণের মিটিয়ে দেন হয়

3. পদ্ধতি প্রোবের অণু, যা একটি নির্দিষ্ট DNA বা RNA প্রোব করার binds থেকে সংকেত স্বীকৃতি উপর ভিত্তি করে। উদাহরণ - শঙ্কর সিস্টেম Hybride ক্যাপচার সিস্টেম সমাধান (hc2)।

এনজাইম যে আণবিক জীববিজ্ঞানের গবেষণা পদ্ধতি ব্যবহার করা যেতে পারে

অনেক আণবিক ডায়গনিস্টিক কৌশল এনজাইমগুলোর ব্যাপক পরিসরের ব্যবহার জড়িত। নীচে প্রায়শই ব্যবহৃত হয়:

1. সীমাবদ্ধতা এনজাইম - "কাটা" প্রয়োজনীয় অংশে DNA অণুর।

2. ডিএনএ পলিমেরেজ - একটি ডবল তন্তুবিশিষ্ট ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিয়িক এসিড অণু synthesizes।

3. বিপরীত ট্রান্সক্রিপটেস (ট্রান্সক্রিপটেস বিপরীত) - একটি RNA- এর টেমপ্লেট থেকে ডিএনএ সংশ্লেষের করতেন।

4. ডিএনএ ligase - নিউক্লিওটাইডের মধ্যে phosphodiester বন্ড গঠনের জন্য দায়ী।

5. exonuclease - ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিয়িক এসিড অণু শেষে অংশ থেকে নিউক্লিওটাইডের সরিয়ে ফেলা হয়।

পিসিআর - ডিএনএ বিকাস মৌলিক পদ্ধতি

পলিমারেজ শৃঙ্খল বিক্রিয়াটি (পিসিআর) ব্যাপকভাবে আধুনিক আণবিক জীববিজ্ঞান ব্যবহার করা হয়। এই পদ্ধতি, যা একটি একক DNA অণুর প্রতিলিপিগুলি (amplifying অণু) বিপুল সংখ্যক প্রাপ্ত করা যাবে।

পিসিআর প্রধান ফাংশন:

- রোগ নির্ণয়ের;

- জিন ডিএনএ অংশ ক্লোনিং।

পূরণকল্পে পলিমেরেজ চেন রিয়াকসান নিম্নলিখিত উপাদানের প্রয়োজন হয়: প্রাথমিক DNA অণুর একটি তাপপ্রয়োগে অপরিবর্তনীয় ডিএনএ পলিমেরেজ (Taq বা Pfu), deoxyribonucleotide ফসফেট (নাইট্রোজেন ঘাঁটি উৎস), primers (2 কার্তুজ 1 DNA অণুর) এবং নিজেই একটি বাফার ব্যবস্থা যা আচার পারে সব প্রতিক্রিয়া।

denaturation, কার্তুজ পোড়ানো এবং প্রতান: পিসিআর তিনটি পদক্ষেপ নিয়ে গঠিত।

1. denaturation। 94-95 ডিগ্রি সেলসিয়াস proshodit একটি তাপমাত্রায় ডিএনএ দুই চেইন মধ্যে হাইড্রোজেন বন্ড ভঙ্গ করে, এবং এর ফলে আমরা দুটি একক তন্তুবিশিষ্ট অণু পেতে।

2. annealed primers। 50-60 ডিগ্রী একটি তাপমাত্রায় শতাংশে বিভক্ত কমপ্লিমেন্টারিটির ধরণ অনুযায়ী একক তন্তুবিশিষ্ট নিউক্লিক এসিড অণু প্রান্তে আরোহণের primers ঘটে।

3. প্রতান। 72 ডিগ্রী তাপমাত্রা এ সংশ্লেষিত কন্যা ডবল ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিয়িক এসিড অণু অসহায় হয়।

ডিএনএ সিকোয়েন্সিং

আনবিক জীববিজ্ঞানের গবেষণা পদ্ধতি প্রায়ই ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিয়িক এসিড একটি অণু নিউক্লিওটাইডের ক্রম জ্ঞান প্রয়োজন। নির্ধারণ জেনেটিক কোড সিকোয়েন্স। ভবিষ্যতের আনবিক ডায়গনিস্টিক জ্ঞান মানুষের ক্রম নির্ধারণ অর্জন উপর ভিত্তি করে করা হবে না।

সিকোয়েন্সিং নিম্নলিখিত প্রকারের:

• Maxam-গিলবার্ট দ্বারা সিকোয়েন্সিং;
• স্যাঙ্গার সিকোয়েন্সিং;
• pyrosequencing;
• nanoporovoe সিকোয়েন্সিং।